本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿中的 HGFA 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于 HGF 活化、肝損傷修復(fù)、組織再生及凝血相關(guān)纖溶調(diào)控研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠肝細胞生長因子激活物elisa試劑盒 | 英文名稱 | HGFA ELISA Kit |
貨號 | CS-5904E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理：
固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠 HGFA 抗體。
結(jié)合：加入標準品或樣本，HGFA 被固相抗體捕獲。
檢測：加入化的抗大鼠 HGFA 抗體和 HRP 標記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復(fù)合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍色變?yōu)辄S色。
測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
樣本要求：
1. 樣本處理
1) 血清：無菌無熱源采集，避免溶血 / 脂血；1000×g 離心 10 min 取上清，-20℃分裝，禁反復(fù)凍融。
2) 血漿：EDTA / 檸檬酸鹽抗凝（慎用肝素），離心分離上清。
3) 細胞上清：1000×g 離心除碎片，-70~-80℃保存。
4) 組織勻漿：預(yù)冷 PBS / 生理鹽水冰上勻漿，高速離心取清亮上清低溫保存。
2. 通用注意
嚴禁加NaN3抑制 HRP 活性；杜絕溶血、渾濁、污染樣本；全程低溫防降解；超標樣本用試劑盒專用稀釋液稀釋，實驗建議設(shè)置復(fù)孔。
操作步驟：
1.平衡試劑：試劑盒室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按比例稀釋備用。
2.加樣：設(shè)空白孔、標準品孔、樣品孔，每孔加對應(yīng)標準品 / 稀釋后樣本，封板溫育。
3.溫育反應(yīng)：37℃孵育 30–60 min，完成抗原抗體結(jié)合。
4.洗板：棄液甩干，洗滌液注滿每孔，浸泡后拍干，重復(fù)洗板3–5 次。
5.加酶結(jié)合物：除空白孔外，每孔加入 HRP 標記抗體，封板 37℃再次溫育。
6.再次洗板：同上述洗板流程，洗凈未結(jié)合游離酶標物。
7.顯色：每孔先后加入 A、B 顯色液，避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數(shù)：加終止液終止反應(yīng)，顏色由藍變黃；立即用酶標儀在對應(yīng)波長測定 OD 值。
9.結(jié)果計算：以標準品濃度、OD 值繪制標準曲線，換算樣本待測指標濃度。
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