產(chǎn)品簡介：
本試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿中的抗中性粒 / 中心體抗體（ACA）濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于自身免疫性血管炎、結締組織病及自身免疫病診斷研究等領域。
產(chǎn)品名稱：大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa試劑盒
英文名稱：ACA ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
產(chǎn)品貨號：CS-5707E
檢測原理：
大鼠抗中性粒 / 中心體抗體 (ACA) ELISA 試劑盒的原理是?間接法?，通過固相載體包被抗原，捕獲樣本中特異性抗體，再用酶標記的二抗進行識別，最后通過底物顯色反應來定量檢測。
?固相化?：微孔板預先包被中性粒 / 中心體抗原。
?結合?：加入標準品或樣本，ACA 抗體與固相抗原結合。
?檢測?：加入 HRP 標記的抗大鼠 IgG 二抗，與結合在固相載體上的抗體形成復合物。
?顯色?：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍色變?yōu)辄S色。
?測定?：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?：
?試劑準備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?：每孔加入100μL標準品或樣本，37℃孵育90分鐘。
?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復5次。
?加檢測抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。
?洗滌?：同步驟3。
?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。
?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍變黃）。
?檢測?：450nm波長測定吸光度(OD值)，15分鐘內完成。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔CEAelisa試劑盒 | 山楂探針法PCR鑒定試劑盒 |
大鼠Slit同源物1(slit1)elisa試劑盒 | 牡蠣皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
猴卡介苗抗體(BCG-Ab)elisa定性檢測試劑盒 | 禽皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
大鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒 | 甲型流感（）病毒H3N2亞型 染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
大鼠GROelisa試劑盒 |
大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa試劑盒球孢白僵染料法熒光定量PCR試劑盒 |
大鼠乙酰CoA羧化酶(ACC)elisa試劑盒 | 傳染性造血器官壞死病病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
大鼠三葉因子2(TFF2)elisa試劑盒 | 牛腸道病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
植物螯合素（Phytochelatins）elisa試劑盒 | 文氏巴爾通體染料法熒光定量PCR試劑盒 |
大鼠鈣調素依賴性蛋白1α(CAMK-1α)elisa試劑盒 | 伯氏疏螺旋體（伯氏包柔螺旋體）染料法熒光定量PCR試劑盒 |
豬小反芻獸疫抗體（PPR）elisa試劑盒 | 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
小鼠原激活肽（TAP）elisa試劑盒 | 天花粉探針法PCR鑒定試劑盒 |
魚腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒 | 痘苗病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
操作步驟?：
1. 試劑準備
將試劑盒所有組分平衡至室溫（20–25℃，≥30min）；濃縮洗滌液按 1:19 稀釋配制工作液。
標準品用標準品稀釋液復溶，梯度稀釋，配置系列濃度梯度標準溶液，備用。
2. 實驗流程
加樣：設置空白孔、標準孔、樣本孔，每孔加入 100 μL 對應標準品 / 待測樣本，封板，37℃恒溫孵育 90 min。
洗滌：棄凈孔內液體，每孔加滿洗滌工作液，靜置 30 s，甩干拍凈，重復洗滌 5 次。
加酶結合物：每孔加入 100 μL HRP 標記檢測抗體，封板混勻，37℃孵育 60 min。
洗滌：重復上述洗滌步驟 5 次，拍干微孔。
顯色：每孔避光加入 90 μL TMB 底物顯色液，輕柔混勻，37℃避光顯色 15 min。
終止：按同等順序每孔快速加入 50 μL 終止液，輕晃混勻，溶液由藍轉黃。
讀數(shù)：15 min 內，酶標儀 450 nm 波長測定各孔 OD 值，擬合標準曲線計算樣本含量。
3. 關鍵質控要點
全程孵育使用專用封板膜，防止液體蒸發(fā)、交叉污染。
洗滌充分為實驗核心，殘留洗液易造成背景偏高、假陽性。
TMB 顯色液避光儲存，現(xiàn)用現(xiàn)加，嚴禁接觸氧化劑。
加終止液順序需與顯色加樣一致，避免局部色差、綠色殘留。
點擊放大
