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產(chǎn)品展示   Productselisa Kit>>大鼠elisa kit>>48T/96T大鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)elisa試劑盒
 
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產(chǎn)品名稱:
大鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)elisa試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):
48T/96T
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
1200
產(chǎn)品特點(diǎn):
大鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)elisa試劑盒本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、上皮細(xì)胞上清液中的角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)蛋白濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于上皮細(xì)胞增殖、皮膚損傷修復(fù)及黏膜保護(hù)研究等領(lǐng)域。
  48T/96T大鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)elisa試劑盒的詳細(xì)資料:

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

大鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)elisa試劑盒

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、上皮細(xì)胞上清液中的角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)蛋白濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于上皮細(xì)胞增殖、皮膚損傷修復(fù)及黏膜保護(hù)研究等領(lǐng)域。

產(chǎn)品名稱:大鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)elisa試劑盒

英文名稱:KGF ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T

產(chǎn)品貨號(hào):CS-5767E

檢測(cè)原理:

大鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)elisa試劑盒

大鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (KGF) ELISA 試劑盒的原理是?雙抗體夾心法?,通過(guò)固相載體捕獲抗原,再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別,最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)。

?固相化?:微孔板預(yù)先包被抗大鼠 KGF 抗體。

?結(jié)合?:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,KGF 被固相抗體捕獲。

?檢測(cè)?:加入生物su化的抗大鼠 KGF 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。

?顯色?:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

?測(cè)定?:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。

實(shí)驗(yàn)步驟?:

大鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)elisa試劑盒

?試劑準(zhǔn)備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋至所需濃度。

?加樣?:每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,37℃孵育90分鐘。

?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復(fù)5次。

?加檢測(cè)抗體?:每孔加入100μL檢測(cè)抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。

?洗滌?:同步驟3。

?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。

?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍(lán)變黃)。

?檢測(cè)?:450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度(OD值),15分鐘內(nèi)完成。

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操作步驟?:

大鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)elisa試劑盒

?1.加樣孵育

每孔精準(zhǔn)加入 100μL 對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品 / 待測(cè)樣本,空白孔加等量;貼封板膜密封微孔板,置于 37℃恒溫孵育箱,避光孵育 90min,保證抗原抗體充分結(jié)合。

2.洗板

輕柔棄去孔內(nèi)液體,吸水紙上快速拍干;每孔加滿洗滌工作液,靜置浸泡 30s,甩干拍凈;重復(fù)洗滌5 次,去除未結(jié)合雜質(zhì),降低背景值。

3.加酶結(jié)合物孵育

除空白孔外,每孔加入 100μL HRP 標(biāo)記特異性檢測(cè)抗體;輕微水平晃板混勻,重新封板,37℃避光恒溫孵育 60min。

4.二次洗板

重復(fù)上述洗板操作 5 次,嚴(yán)格拍干孔內(nèi)殘留液體,杜絕殘留洗液造成假陽(yáng)性、數(shù)據(jù)偏差。

5.底物顯色

避光條件下,每孔加入 90μL TMB 底物顯色液,輕柔混勻;37℃避光精準(zhǔn)孵育 10~15min,此時(shí)液體逐步顯現(xiàn)藍(lán)色,顯色深淺與待測(cè)物含量正相關(guān)。

6.反應(yīng)終止

嚴(yán)格遵循加樣順序,每孔快速加入 50μL 酸性終止液,輕晃微孔板充分混勻,藍(lán)色即刻轉(zhuǎn)為黃色,終止酶促顯色反應(yīng)。

7.上機(jī)讀數(shù)檢測(cè)

加終止液后15min 內(nèi),用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔 450nm 波長(zhǎng)吸光度(OD 值);以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD 值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,擬合方程計(jì)算待測(cè)樣本目標(biāo)蛋白濃度。


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