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本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)大鼠腦組織、腦脊液、細(xì)胞裂解液中的 βAPP 濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于阿爾茨海默病、淀粉樣代謝、神經(jīng)退行性病變及突觸功能研究。

核心原理：

固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠 βAPP 抗體。

結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，βAPP 被固相抗體捕獲。

檢測(cè)：加入化的抗大鼠 βAPP 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素，形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。

顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

測(cè)定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。

樣本要求：

1. 樣本處理

1) 血清：無(wú)菌無(wú)熱源采血管采集，避免溶血 / 脂血；1000×g 離心 10 min 取上清，-20℃分裝，禁反復(fù)凍融。

2) 血漿：EDTA / 檸檬酸鹽抗凝（慎用肝素），離心分離上清。

3) 細(xì)胞上清：1000×g 離心除碎片，-70~-80℃保存。

4) 組織勻漿：預(yù)冷 PBS / 生理鹽水冰上勻漿，高速離心取清亮上清低溫保存。

2. 通用注意

嚴(yán)禁加NaN3抑制 HRP 活性；杜絕溶血、渾濁、污染樣本；全程低溫防降解；超標(biāo)樣本用試劑盒專用稀釋液稀釋，實(shí)驗(yàn)建議設(shè)置復(fù)孔。

操作步驟：

1.平衡試劑：試劑盒室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按比例稀釋備用。

2.加樣：設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣品孔，每孔加對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品 / 稀釋后樣本，封板溫育。

3.溫育反應(yīng)：37℃孵育 30–60 min，完成抗原抗體結(jié)合。

4.洗板：棄液甩干，洗滌液注滿每孔，浸泡后拍干，重復(fù)洗板3–5 次。

5.加酶結(jié)合物：除空白孔外，每孔加入 HRP 標(biāo)記抗體，封板 37℃再次溫育。

6.再次洗板：同上述洗板流程，洗凈未結(jié)合游離酶標(biāo)物。

7.顯色：每孔先后加入 A、B 顯色液，避光 37℃顯色 10–15 min。

8.終止讀數(shù)：加終止液終止反應(yīng)，顏色由藍(lán)變黃；立即用酶標(biāo)儀在對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)測(cè)定 OD 值。

9.結(jié)果計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)品濃度、OD 值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，換算樣本待測(cè)指標(biāo)濃度。

公司正在出售的產(chǎn)品：