產(chǎn)品簡介：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠細(xì)胞裂解液、組織勻漿及血清中的 IP3 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于細(xì)胞內(nèi)鈣信號(hào)通路、第二信使、膜受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及細(xì)胞應(yīng)激研究。
產(chǎn)品名稱：大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa試劑盒
英文名稱:IP3 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
貨號(hào):CS-6288E
檢測原理：
大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過固相載體捕獲抗原，再用酶標(biāo)記的檢測抗體進(jìn)行識(shí)別，最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。
固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠 IP3 抗體。
結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，IP3 被固相抗體捕獲。
檢測：加入化的抗大鼠 IP3 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素，形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
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實(shí)驗(yàn)步驟?：
1. 試劑準(zhǔn)備
將試劑盒所有組分平衡至室溫（20–25℃，≥30min）；濃縮洗滌液按 1:19 稀釋配制工作液。
標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液復(fù)溶，梯度稀釋，配置系列濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。
2. 實(shí)驗(yàn)流程
加樣：設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、樣本孔，每孔加入 100 μL 對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品 / 待測樣本，封板，37℃恒溫孵育 90 min。
洗滌：棄凈孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌工作液，靜置 30 s，甩干拍凈，重復(fù)洗滌 5 次。
加酶結(jié)合物：每孔加入 100 μL HRP 標(biāo)記檢測抗體，封板混勻，37℃孵育 60 min。
洗滌：重復(fù)上述洗滌步驟 5 次，拍干微孔。
顯色：每孔避光加入 90 μL TMB 底物顯色液，輕柔混勻，37℃避光顯色 15 min。
終止：按同等順序每孔快速加入 50 μL 終止液，輕晃混勻，溶液由藍(lán)轉(zhuǎn)黃。
讀數(shù)：15 min 內(nèi)，酶標(biāo)儀 450 nm 波長測定各孔 OD 值，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本含量。
3. 關(guān)鍵質(zhì)控要點(diǎn)
全程孵育使用專用封板膜，防止液體蒸發(fā)、交叉污染。
洗滌充分為實(shí)驗(yàn)核心，殘留洗液易造成背景偏高、假陽性。
TMB 顯色液避光儲(chǔ)存，現(xiàn)用現(xiàn)加，嚴(yán)禁接觸氧化劑。
加終止液順序需與顯色加樣一致，避免局部色差、綠色殘留。
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