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本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的酸性成纖維細(xì)胞生長因子（aFGF/FGF-1）蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于血管生成、組織修復(fù)、細(xì)胞增殖及腫瘤研究等領(lǐng)域。

產(chǎn)品名稱：大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子elisa試劑盒

英文名稱：aFGF/FGF-1 ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

產(chǎn)品貨號(hào)：CS-5485E

核心原理：

大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子 (aFGF/FGF-1) elisa 試劑盒的原理是?雙抗體夾心法?，通過固相載體捕獲抗原，再用酶標(biāo)記的檢測抗體進(jìn)行識(shí)別，最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。

?固相化?：微孔板預(yù)先包被抗大鼠 aFGF/FGF-1 抗體。

?結(jié)合?：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，aFGF/FGF-1 被固相抗體捕獲。

?檢測?：加入生物su化的抗大鼠 aFGF/FGF-1 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。

?顯色?：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

?測定?：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。

樣本要求：

1. 樣本類型與處理

?血清?：使用無熱原/內(nèi)毒素試管采集，避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清，-20℃保存，避免反復(fù)凍融。

?血漿?：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，離心后取上清。

?細(xì)胞上清?：1000×g離心10分鐘去除顆粒，-70℃保存。

?組織勻漿?：生理鹽水勻漿后離心取上清，-20℃保存。

2. 注意事項(xiàng)

樣本中禁止添加NaN3，以免抑制HRP活性。

細(xì)胞培養(yǎng)上清可能因細(xì)胞狀態(tài)等因素導(dǎo)致檢測波動(dòng)，建議設(shè)復(fù)孔。

操作步驟：

1. 試劑準(zhǔn)備將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。標(biāo)準(zhǔn)品按說明書進(jìn)行梯度稀釋，配制系列濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。
2. 實(shí)驗(yàn)流程加樣：設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔，空白孔僅加稀釋液，其余孔分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品，37℃孵育。加酶標(biāo)抗體：除空白孔外，每孔加入酶標(biāo)抗體，輕輕混勻，37℃避光孵育。洗滌：棄去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后甩干，重復(fù)洗滌 4-5 次，最后拍干殘留液體。顯色：每孔加入 TMB 顯色液，37℃避光孵育，孔內(nèi)呈現(xiàn)藍(lán)色。終止：每孔加入終止液，混勻后顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色。檢測：在 450nm 波長下測定各孔 OD 值，15 分鐘內(nèi)完成讀數(shù)。

公司正在出售的產(chǎn)品：