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本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿、細胞上清、淋巴細胞培養(yǎng)上清中的 IL-9 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于過敏性炎癥、哮喘、寄生蟲感染、T 細胞亞群分化及黏膜免疫研究。

核心原理：

固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠 IL-9 抗體。

結(jié)合：加入標準品或樣本，IL-9 被固相抗體捕獲。

檢測：加入化的抗大鼠 IL-9 抗體和 HRP 標記親和素，形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物。

顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍色變?yōu)辄S色。

測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。

樣本要求：

1. 樣本處理

1) 血清：無菌無熱源采血管采集，避免溶血 / 脂血；1000×g 離心 10 min 取上清，-20℃分裝，禁反復凍融。

2) 血漿：EDTA / 檸檬酸鹽抗凝（慎用肝素），離心分離上清。

3) 細胞上清：1000×g 離心除碎片，-70~-80℃保存。

4) 組織勻漿：預(yù)冷 PBS / 生理鹽水冰上勻漿，高速離心取清亮上清低溫保存。

2. 通用注意

嚴禁加NaN3抑制 HRP 活性；杜絕溶血、渾濁、污染樣本；全程低溫防降解；超標樣本用試劑盒專用稀釋液稀釋，實驗建議設(shè)置復孔。

操作步驟：

關(guān)鍵實操技巧

1.加樣技巧

一次性換新槍頭，垂直貼孔壁低位加液；避免氣泡、飛濺交叉污染；整板加樣速度均勻統(tǒng)一。

2.溫育控溫

須37℃恒溫、封板膜嚴實防蒸發(fā)冷凝；時間嚴格卡死，過長背景高、過短信號低。

3.洗板核心

每孔注滿不溢出，浸泡≥30 s；拍干用無塵吸水紙，杜絕殘留；洗板不足直接高背景、假陽性。

4.樣本規(guī)范

杜溶血、脂濁、污染樣本；禁止反復凍融；嚴禁含 NaN?抑制 HRP 活性；濃度超標只用試劑盒配套稀釋液。

5.顯色與讀數(shù)

全避光；整板顯色時長一致；加終止液立刻讀數(shù)，放置越久數(shù)值漂移越大。

6.基礎(chǔ)質(zhì)控

樣本、標準均做復孔；室溫潔凈避光操作；試劑分裝取用，減少反復開蓋失效。

公司正在出售的產(chǎn)品：