產(chǎn)品簡介：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠腦組織勻漿、細胞提取物中的 β 位淀粉樣前體蛋白裂解酶 1（BACE1）蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于阿爾茨海默病、淀粉樣蛋白沉積、神經(jīng)退行性疾病及腦損傷研究等領域。
產(chǎn)品名稱：大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1elisa試劑盒
英文名稱：BACE1 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
產(chǎn)品貨號：CS-6118E
檢測原理：
大鼠 β 位淀粉樣前體蛋白裂解酶 1 (BACE1) ELISA 試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過固相載體捕獲抗原，再用酶標記的檢測抗體進行識別，最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化：微孔板預先包被抗大鼠 BACE1 抗體。
結(jié)合：加入標準品或樣本，BACE1 被固相抗體捕獲。
檢測：加入生物su化的抗大鼠 BACE1 抗體和 HRP 標記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍色變?yōu)辄S色。
測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?：
?試劑準備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?：每孔加入100μL標準品或樣本，37℃孵育90分鐘。
?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復5次。
?加檢測抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。
?洗滌?：同步驟3。
?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。
?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍變黃）。
?檢測?：450nm波長測定吸光度(OD值)，15分鐘內(nèi)完成。
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操作步驟?：
1.試劑提前室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設置空白孔、標準品孔、待測樣品孔，精準加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結(jié)合反應，結(jié)束后棄孔內(nèi)液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗，重復洗板 3–5 次，去除未結(jié)合雜質(zhì)。
5.除空白孔外，每孔加入 HRP 酶結(jié)合物，再次 37℃溫育。
6.重復洗板流程洗凈游離酶標抗體，保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色，待梯度藍色清晰顯現(xiàn)。
8.加入終止液終止反應，顏色由藍轉(zhuǎn)黃，即刻用酶標儀讀取 OD 值。
9.根據(jù)標準曲線擬合計算，得出樣本目標物質(zhì)濃度。
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