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本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的 RF 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于類風濕關(guān)節(jié)炎模型、自身免疫反應、免疫復合物沉積及關(guān)節(jié)病變研究等領(lǐng)域。

核心原理：

固相化：微孔板預先包被抗大鼠 RF 抗體。

結(jié)合：加入標準品或樣本，RF 被固相抗體捕獲。

檢測：加入化的抗大鼠 RF 抗體和 HRP 標記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。

顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍色變?yōu)辄S色。

測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。

樣本要求：

1. 樣本類型與處理

血清：無熱源無菌采血管采集，杜絕溶血、脂血污染；1000×g 離心 10 min 分離上清，-20℃分裝保存，嚴禁反復凍融。血漿：選用 EDTA / 檸檬酸鹽 / 肝素抗凝管采血混勻，離心去除血細胞取上清備用（部分試劑盒慎用肝素）。細胞上清：收集后 1000×g 離心 10 min 去除細胞碎片與雜質(zhì)，-70~-80℃低溫保存。組織勻漿：預冷生理鹽水 / PBS 冰上制備勻漿，高速離心取澄清上清，-20℃避光分裝貯存。

2. 通用注意事項

1) 樣本嚴禁添加疊氮鈉（NaN?），會抑制 HRP 酶活性，導致顯色失效。

2) 所有樣本避免室溫久置，全程低溫操作，防止蛋白降解。

3) 溶血、渾濁、微生物污染樣本直接廢棄，干擾抗體抗原結(jié)合。

4) 細胞上清、低豐度指標樣本務(wù)必設(shè)置復孔，校正實驗誤差。

5) 檢測濃度超標時，僅用試劑盒配套稀釋液稀釋，匹配基質(zhì)體系。

操作步驟：

1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標準品。

2. 每孔加 100μL 標準 / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。

3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。

4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。

5. 450nm 快速測 OD 值，擬合曲線算濃度。

公司正在出售的產(chǎn)品：