本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的 PCNA 濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于細(xì)胞增殖活性、DNA 復(fù)制、腫瘤生長(zhǎng)及組織修復(fù)研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)elisa試劑盒 | 英文名稱 | PCNA ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-5708E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
核心原理：
固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠 PCNA 抗體。
結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，PCNA 被固相抗體捕獲。
檢測(cè)：加入化的抗大鼠 PCNA 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測(cè)定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
樣本要求：
1. 樣本處理
1) 血清：無(wú)菌無(wú)熱源采血管采集，避免溶血 / 脂血；1000×g 離心 10 min 取上清，-20℃分裝，禁反復(fù)凍融。
2) 血漿：EDTA / 檸檬酸鹽抗凝（慎用肝素），離心分離上清。
3) 細(xì)胞上清：1000×g 離心除碎片，-70~-80℃保存。
4) 組織勻漿：預(yù)冷 PBS / 生理鹽水冰上勻漿，高速離心取清亮上清低溫保存。
2. 通用注意
嚴(yán)禁加NaN3抑制 HRP 活性；杜絕溶血、渾濁、污染樣本；全程低溫防降解；超標(biāo)樣本用試劑盒專用稀釋液稀釋，實(shí)驗(yàn)建議設(shè)置復(fù)孔。
操作步驟：
1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 每孔加 100μL 標(biāo)準(zhǔn) / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。
5. 450nm 快速測(cè) OD 值，擬合曲線算濃度。
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