產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿及血小板培養(yǎng)液中的血栓素B2（TXB2）含量。檢測(cè)范圍覆蓋0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá)0.16 ng/mL，適用于血小板聚集、血栓形成、炎癥反應(yīng)及心血管疾病相關(guān)研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱：大鼠血栓素B2(TXB2)elisa試劑盒
英文名稱：TXB2 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
產(chǎn)品貨號(hào)：CS-5335E
檢測(cè)原理：
大鼠血栓素B2(TXB2) elisa試劑盒的原理是競(jìng)爭(zhēng)法，通過(guò)固相載體包被抗原與樣本抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體，再用酶標(biāo)記二抗進(jìn)行識(shí)別，最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)。
固相化：微孔板預(yù)先包被大鼠TXB2人工抗原。
結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本與特異性抗體混合液，樣本TXB2與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體。
檢測(cè)：加入HRP標(biāo)記的二抗，與結(jié)合在固相載體上的抗體形成復(fù)合物。
顯色：加入TMB底物，被HRP催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測(cè)定：用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度(OD值)，濃度與OD值成反比。
實(shí)驗(yàn)步驟?：
1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 每孔加 100μL 標(biāo)準(zhǔn) / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。
5. 450nm 快速測(cè) OD 值，擬合曲線算濃度。
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操作步驟?：
?1、試劑與樣本準(zhǔn)備?：
將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），按說(shuō)明書稀釋洗滌緩沖液（通常1:19）。
?標(biāo)準(zhǔn)品?：用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。
?樣本?：血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高，可按說(shuō)明書（如1:10）稀釋。
?2、加樣與孵育?：
每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本。
輕輕振蕩混勻，避免觸碰孔壁。
37℃孵育90分鐘（部分試劑盒可能為120分鐘，需以說(shuō)明書為準(zhǔn)）。
?3、洗滌?：
棄去孔內(nèi)液體，用洗滌緩沖液加滿每孔，靜置30秒后甩干，重復(fù)5-6次。
4?、加檢測(cè)抗體與孵育?：
每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測(cè)抗體。
37℃孵育60分鐘。
5?、再次洗滌?：
同步驟3，洗去未結(jié)合抗體。
6?、顯色?：
每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。
37℃避光孵育10-15分鐘。
?7、終止與測(cè)定?：
每孔加入50μL終止液，立即混勻（顏色由藍(lán)變黃）。
在加終止液后15分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔吸光度（OD值）。
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