產(chǎn)品及特點(diǎn)：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，使每個(gè)循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
魯氏耶爾森菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Yersinia ruckeri | EY00P9509 |
運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為12個(gè)月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品，設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽性對照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝，該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板，省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管，其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對照（用水做模板），6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1個(gè)用于PCR陽性對照（用第4號管的陽性對照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
強(qiáng)啡肽A（8-17）脫落酸(天然) 95%Human ZC3HAV1L ELISA Kit
強(qiáng)啡肽A（9-17）脫落酸(天然) 90%Human ZC3HC1 ELISA Kit
強(qiáng)啡肽A酰，豬羥甲硝咪唑-同位素 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human ZC3HAV1 ELISA Kit
強(qiáng)啡肽B（1-9）對甲酸甲酯 99%Human ZFP36L2 ELISA Kit
E-I-L-D-V,人，牛，大鼠鄰 98%Human NMT1(Glycylpeptide N-tetradecanoyltransferase 1) ELISA Kit
E-I-L-E-V-P-S-T赤霉素 >90% (HPLC)Human ZCCHC11 ELISA Kit
E75, Her - 2/neu (369 - 377)赤霉素 ≥96% (HPLC)Human ZFP64 ELISA Kit
細(xì)胞合成蛻殼啟動激素，煙草天蛾赤霉素 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human ZCCHC6 ELISA Kit
上表皮生長因子受體（988-993）（磷酸化），人赤霉素 植物細(xì)胞培養(yǎng)級，≥96% (HPLC)Human ZCCHC7 ELISA Kit
上表皮生長因子受體底物16-芐氨基嘌呤 99%Human ZFP90 ELISA Kit
上表皮生長因子受體底物24-溴吲哚 98%Human ZCCHC8 ELISA Kit
表皮生長因子受體導(dǎo)出肽乙烯利 >90.0%(HPLC)Human TAC3(Tachykinin-3) ELISA Kit
海兔產(chǎn)卵激素乙烯利 80%Human ZCRB1 ELISA Kit
水蛭蛋白酶抑制劑c（41-49）乙烯利 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human ZDHHC13 ELISA Kit
水蛭蛋白酶抑制劑c（60-63）-甲酯增甘膦 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human ZDHHC15 ELISA Kit
魯氏耶爾森菌探針法PCR熒光定量試劑盒停靠蛋白7(DOK7)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)三乙(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)
二肽酶2(DPEP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)十三烷(Standard for GC,>99%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
二肽酶3(DPEP3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)1,1,1-三氯乙烷(包含0.05% C4H8O2 穩(wěn)定劑,standard for GC,≥99.5%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T)
肌肽酶2(CNDP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)三溴(Standard for GC) 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)
脊椎蛋白2(SPON2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)叔丁(analytical standard,>99.8%（GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)
內(nèi)皮素2(EDN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)十四(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(T)
腓骨蛋白7(FBLN7)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)(Standard for GC,>99.7%) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)
四旋蛋白6(TSPAN6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)1,1,2-三氯乙烷(standard for GC,≥99.8%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)(T)
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