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本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的 CXC 趨化因子配體 1（CXCL1）濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于中性粒細胞趨化、急性炎癥及組織損傷修復研究等領域。

核心原理：

固相化：微孔板預先包被抗小鼠 CXCL1 抗體。

結合：加入標準品或樣本，CXCL1 被固相抗體捕獲。

檢測：加入化的抗小鼠 CXCL1 抗體和 HRP 標記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。

顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍色變?yōu)辄S色。

測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。

樣本要求：

1. 樣本類型與處理

?血清?：使用無熱原/內毒素試管采集，避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清，-20℃保存，避免反復凍融。

?血漿?：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，離心后取上清。

?細胞上清?：1000×g離心10分鐘去除顆粒，-70℃保存。

?組織勻漿?：生理鹽水勻漿后離心取上清，-20℃保存。

2. 注意事項

樣本中禁止添加NaN3，以免抑制HRP活性。

細胞培養(yǎng)上清可能因細胞狀態(tài)等因素導致檢測波動，建議設復孔。

操作步驟：

1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標準品。

2. 每孔加 100μL 標準 / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。

3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。

4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。

5. 450nm 快速測 OD 值，擬合曲線算濃度。

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