產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)貝類雄性血清、淋巴液、性腺及組織勻漿中的 11-KT 濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于貝類雄性性腺發(fā)育、精子發(fā)生、繁殖內(nèi)分泌及雄激素代謝研究。
產(chǎn)品名稱：貝類11-酮基睪酮（11-KT）ELISA檢測(cè)試劑盒
英文名稱:11-KT ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
貨號(hào):CS-MY3689
檢測(cè)原理：
貝類11-酮基睪酮（11-KT） ELISA檢測(cè)試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過(guò)固相載體捕獲抗原，再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別，最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)。
固相化：微孔板預(yù)先包被抗貝類 11-KT 抗體。
結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，11-KT 被固相抗體捕獲。
檢測(cè)：加入化的抗貝類 11-KT 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素，形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測(cè)定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
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實(shí)驗(yàn)步驟?：
1. 試劑準(zhǔn)備
將試劑盒所有組分平衡至室溫（20–25℃，≥30min）；濃縮洗滌液按 1:19 稀釋配制工作液。
標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液復(fù)溶，梯度稀釋，配置系列濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。
2. 實(shí)驗(yàn)流程
加樣：設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、樣本孔，每孔加入 100 μL 對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品 / 待測(cè)樣本，封板，37℃恒溫孵育 90 min。
洗滌：棄凈孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌工作液，靜置 30 s，甩干拍凈，重復(fù)洗滌 5 次。
加酶結(jié)合物：每孔加入 100 μL HRP 標(biāo)記檢測(cè)抗體，封板混勻，37℃孵育 60 min。
洗滌：重復(fù)上述洗滌步驟 5 次，拍干微孔。
顯色：每孔避光加入 90 μL TMB 底物顯色液，輕柔混勻，37℃避光顯色 15 min。
終止：按同等順序每孔快速加入 50 μL 終止液，輕晃混勻，溶液由藍(lán)轉(zhuǎn)黃。
讀數(shù)：15 min 內(nèi)，酶標(biāo)儀 450 nm 波長(zhǎng)測(cè)定各孔 OD 值，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本含量。
3. 關(guān)鍵質(zhì)控要點(diǎn)
全程孵育使用專用封板膜，防止液體蒸發(fā)、交叉污染。
洗滌充分為實(shí)驗(yàn)核心，殘留洗液易造成背景偏高、假陽(yáng)性。
TMB 顯色液避光儲(chǔ)存，現(xiàn)用現(xiàn)加，嚴(yán)禁接觸氧化劑。
加終止液順序需與顯色加樣一致，避免局部色差、綠色殘留。
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