大鼠毛囊干細胞永生化
英文名稱 | 大鼠毛囊干細胞永生化 | 規(guī)格 | 1×106cells |
種屬 | 大鼠 | 生長特性 | 貼壁培養(yǎng) |
細胞形態(tài) | 鋪路石狀細胞，不規(guī)則細胞， | 貨號 | E-XB6600 |
用途 | 僅供科研研究實驗 | 貨期 | 現(xiàn)貨 |
毛囊干細胞是在人的毛囊外根鞘隆突部中的一種。毛囊干細胞屬于成體干細胞，具有，在體內(nèi)處于靜止狀態(tài)，在體內(nèi)培養(yǎng)活內(nèi)環(huán)境作用下表現(xiàn)出驚人的增殖能力。研究發(fā)現(xiàn)，毛囊干細胞具有多向分化潛能，它可以分化成表皮、毛囊、皮脂腺，參與皮膚創(chuàng)傷愈合的過程。
1) 組織來源于實驗動物的正常皮膚組織。 2) 細胞鑒定：角蛋白(CK-19)免疫熒光染色為陽性。 3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。 4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。 5) 細胞生長方式：鋪路石狀細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。 |
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否*揮發(fā)，細胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。.觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9. 注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
1)復蘇細胞：將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3)細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
人大隱靜脈平滑肌細胞 | 兔杏仁核神經(jīng)元細胞 |
NCI-H2085細胞 | 兔牙齦上皮細胞 |
NCI-H2291細胞 | 豬頸動脈平滑肌細胞 |
NCI-H2342細胞 | 豬卵巢內(nèi)膜細胞 |
NCI-H2087細胞 | 羊骨骼肌細胞 |
NCI-H209細胞 | 人肺成纖維細胞 |
NCI-H2106細胞 | 人肝動脈平滑肌細胞 |
NCI-H211[H211]細胞 | 人直腸成纖維細胞 |
NCI-H2110細胞 | 人結(jié)腸上皮細胞 |
NCI-H2122細胞 | 人甲狀腺成纖維細胞 |
NCI-H2170細胞 | 人輸卵管上皮細胞 |
NCI-H2171細胞 | 人睪丸支持細胞 |
NCI-H2172細胞 | 大鼠毛囊干細胞永生化人毛囊角質(zhì)細胞 |
NCI-H2195[H2195]細胞 | 人瘢痕疙瘩成纖維細胞 |
NCI-H2227細胞 | 人脾小梁平滑肌細胞 |
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