本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)小鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK）蛋白濃度。檢測(cè)范圍覆蓋0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá)0.16 ng/mL，適用于細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞增殖分化及腫瘤發(fā)生機(jī)制研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶elisa試劑盒 | 英文名稱 | pERK ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-0902E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
核心原理：
?固相化?：微孔板預(yù)先包被抗小鼠pERK抗體。
?結(jié)合?：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，pERK被固相抗體捕獲。
?檢測(cè)?：加入化的抗小鼠pERK抗體和HRP標(biāo)記的親和素，形成"抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。
?顯色?：加入TMB底物，被HRP催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
?測(cè)定?：用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度(OD值)，濃度與OD值成正比。
樣本要求：
1. 樣本類型與處理
?血清?：使用無(wú)熱原/內(nèi)毒素試管采集，避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清，-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
?血漿?：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，離心后取上清。
?細(xì)胞上清?：1000×g離心10分鐘去除顆粒，-70℃保存。
?組織勻漿?：生理鹽水勻漿后離心取上清，-20℃保存。
2. 注意事項(xiàng)
樣本中禁止添加NaN3，以免抑制HRP活性。
細(xì)胞培養(yǎng)上清可能因細(xì)胞狀態(tài)等因素導(dǎo)致檢測(cè)波動(dòng)，建議設(shè)復(fù)孔。
操作步驟：
1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 每孔加 100μL 標(biāo)準(zhǔn) / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。
5. 450nm 快速測(cè) OD 值，擬合曲線算濃度。
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